卡维记得的与血管移植有关的就只有这些,再往后,同种自体和异体血管移植便被一根根日新月异的人工血管逐渐取代。
实验开始之前需要决定制备方法。
卡维身处19世纪,科学技术落后,没有前人的实验条件,血管制备和保存变得格外困难,许多历史上曾经使用过的制备方法都无法实现,必须做出更改后一个个去尝试。
常用的血管制备储存方法有两种,一种是进行溶液试剂浸泡,另一种则是急速冰冻低温干燥。
现在制冷技术才刚开了个头,太过落后,过程复杂不说,温度也达不到卡维的要求。而溶液浸泡因为主要抗生素的缺失(青霉素+链霉素+一代头孢+甲硝唑),卡维只能在保留原有保养液的基础上,再多添加了几种可以阻隔细菌感染的溶剂,尽可能找出最合适的一种。
原本甲醛也是个不错的选择,1867年也正是德国化学家霍夫曼发明人工合成甲醛的年份,但离正式工业生产还有一段时间。
所以最后制备所用试剂定为,石蜡油、高浓度乙醇以及混入亚甲蓝抗菌的同体血清保养液。相比甲醛、无水乙醇、干冰和弱碱性抗菌保养液,这些只能算做简陋版。
所以他才需要费尔南身上的血管做参照,看看石炭酸的可能性,同时也需要看看经过那么久浸泡后的血管,还有没有可能成为移植的替代品。毕竟有免疫排斥的存在,就算抗原处理得再干净,异种移植终究也是下下选。
其实所用制剂所要达到的效果,无非就是保持细胞间质不受改变和变性,同时保持无菌状态,防止移植后出现感染,影响血管的使用寿命。
实验预计进行约50次血管切取手术,样本数量在150-200之间。每一种制备方法需要分成3天后、9天后、15天后和60天后四种,分别进行血管移植。待血管移植成功后进行临床观察,然后分批在术后1、3、5、7、9、11及一年以上予以处死,最后对血管移植后组织变化进行切片观察。
“这是记录表。”
“怎么才三种?”
“储存2个月意味着第一个实验时间节点在3个月后,我还没有天真到,让贝莎干等三个月才做手术。至少这种天真的想法不应该出现在现行的实验计划里,存放2个月的血管样本就先存着,等以后单独做记录吧。”
卡维继续说道:“还有术后并发症观察记录表,填的时候写好术后时间。实验随时都会出现新状况,到时候如果有必要,你们再做修改。”
负责实验犬的萨瓦林点点头:“那死亡记录呢?”
“还是老样子,等真有半路死的,你们再拟定一份记录单。”卡维简单想了些可能,“一般就是手术中死亡、术后严重血栓、出血性休克、腹膜炎、肺栓塞、肠系膜栓塞、肺部感染.大概这些。”
众人纷纷做好记录,第一批狗被送上了手术台。
取血管要比之后的移植手术简单得多,但仍需要尽量做到无菌操作。为了减少外因对实验的影响,霍特不得不让巴黎大学医学院清空了实验楼顶楼,把一整个楼层全给了卡维。其中就有一间实验室被改造成了手术室,进入必须换上干净衣服,戴上帽子和口罩,要求比手术剧场还要严格。
“取血管我就不参与了,你们做吧。”卡维简单介绍了流程,“放血致死后取出整根主动脉,将血管周围的组织剥离干净,管内用生理盐水冲洗干净,侧支血管稍作保留。然后切成5的小段,浸没在制备试剂里。”
“懂了。”
从6月5日上午开始,直到6月7日卡维拿回费尔南的动脉标本,实验小组已经完成了178份血管样本收集。它们被细分成了16个小组,按照制备储存的时间长短顺序分别进行实验。
6月8日一早,卡维便开始了第一台同种异体狗腹主动脉移植手术。
手术并不容易,狗的体型要比人类小得多,血管直径也小得多。手术入路选择侧腹,手术的视野也要比人类手术小得多。当然最关键的点在于,卡维需要让自己的实验小组成员学会这台手术。